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HJ-2型黃曲梅素測(cè)定儀操作步驟

更新時(shí)間:2017-07-27      瀏覽次數(shù):1120

HJ-2型黃曲梅素測(cè)定儀操作步驟

一、 工作原理

本裝置采用薄層層析方法,樣品中黃曲梅毒素B1經(jīng)提取濃縮薄層分離后,在波長(zhǎng)365nm紫外光下產(chǎn)生紫色熒光,根據(jù)其在薄層上顯示熒光的低檢測(cè)量來測(cè)定含量。

二、 技術(shù)參數(shù)

檢測(cè)樣品:糧食、飲料、水果、肉類、魚蝦類發(fā)酵產(chǎn)品;

低檢測(cè)量:0.0004微克;

工作電壓:交流220V,50Hz;

烘板器:加熱面積220mmX200mm,功率600W

        重量6kg,

        外形尺寸:270mmX235mmX150mm;

點(diǎn)樣器:點(diǎn)樣直徑<3mm,

        工作尺寸:200mmX200mm,

        重量8kg,

        外形尺寸:280mmX245mmX315mm;

觀察箱:紫外光波365nm,功率12W,

        重量11kg,

        外形尺寸:300mmX310mmX445mm。

 

三、 操作方法

1、 準(zhǔn)備工作

(1) 薄層板的制備:薄層板一般采用表面光滑的玻璃板在板面上涂有一層0.25-0.5mm的吸附劑而成。玻璃板要求厚度均勻,平整、清潔(薄層板無規(guī)格,常用5×15,8×15,10×20,20×20等規(guī)格)。

將準(zhǔn)備的薄層板洗滌清潔后、風(fēng)干或烘干。制板前用浸有乙醇的脫脂棉擦凈。

(2) 調(diào)漿:調(diào)漿是薄層板是否能制成功的關(guān)鍵,吸附劑用量根據(jù)制備厚度來確定,一般厚度為0.258-0.3mm,5×15cm板需吸附劑1克,8×15cm板需1.5-1.6克。取吸附劑一份于小型研缽中加二份水迅速研磨,研磨后再加一份水繼續(xù)研磨(或一次加足),當(dāng)漿液開始調(diào)稠時(shí),立即涂布(加CMC可一次涂若干塊)。漿吸附劑均勻地鋪在玻璃板上。

2、 活化:活化的作用是調(diào)節(jié)吸附劑的含水量,以得到適宜的活性,將涂布好的薄層板待自然晾干后,放入烘箱內(nèi),溫度調(diào)節(jié)到100℃左右,置二小時(shí),將薄層板取出,置入干燥器中備用,三天后要把薄層板重新活化或臨用前放在烘板器上活化20-30分鐘(溫度控制在80℃),即可適用。

3、 點(diǎn)樣:使點(diǎn)樣液滴在制好的薄層板上,把微量注射器(常用規(guī)格0.5、1.5、10、100微升,可根據(jù)需要選用)固定在點(diǎn)樣器的固定架上,即可上、下、左、右點(diǎn)樣。微量注射器是薄層點(diǎn)樣常用的工具,洗滌是用有機(jī)溶劑,不能用堿洗。使用時(shí)刻將微量注射器針頭稍磨平,操作時(shí)給予一定沖力,同時(shí)開啟冷風(fēng)邊點(diǎn)邊吹干。樣點(diǎn)滴加在薄層板上位置、距底、距側(cè)及兩點(diǎn)之間的距離均應(yīng)大于1.5cm,原點(diǎn)尖應(yīng)同一原始線上,大小應(yīng)基本一致。將活化點(diǎn)的薄層板放在點(diǎn)樣器上,對(duì)好距離,開啟背景燈,然后將吸有樣液的微量注射器固定好,開啟冷風(fēng),然后輕輕壓下微量注射器邊點(diǎn)邊吸干,圓點(diǎn)直徑控制在3mm以內(nèi)。

4、 展開:將點(diǎn)好樣液的薄層板,放置在放有溶劑的展干燥缸中、使樣點(diǎn)在展開劑的移動(dòng)下進(jìn)行分層。

5、 顯色:熒光箱采用紫外光線照射法,使帶熒光的物質(zhì)可直接在紫外燈下觀察斑點(diǎn)位置。開啟燈箱后,即可適用,不需預(yù)熱。黃曲梅毒素低檢出量為0.0004微克,儀器觀察口涂有保護(hù)膜能有效地保護(hù)操作人員視力免受紫外光照射。

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